Kazmierczak P, McCabe P, Turina M, Jacob-Wilk D, and Van Alfen NK. (2012)
The mycovirus CHV1 disrupts secretion of a developmentally regulated protein in Cryphonectria parasitica. Journal of Virology 86(11):6067-6074
:밤나무 줄기마름병균 Cryphonectria parasitica의 cryphonectria hypovirus 1(CHV1) 감염은 저병원성화 현상과 색소침착, 포자생성능력을 감소시킨다. 분화과정 중에 조절되는 곰팡이의 key 유전자들의 transcriptional down regulation은 영양 성장에는 영향을 받지 않는다. 이전 연구에서는 CHV1이 replication을 위해 Trans Golgi Network(TGN)의 secretory vesicle을 활용하는 것으로 나타났다. 본 연구에서는 C. parasitica의 세포벽에 풍부한 소수성 단백질인 cryparin이 바이러스 감염 여부에 따라 분비작용에 대한 영향을 탐색하는 marker로써 선택되었다. Subcellular fractionation, cryparin-green fluorescent protein (GFP) fusion, Western blot analysis을 통해 cryparin을 포함하는 vesicle이 viral replication complex 와 TGN resident endoprotease Kex2 의 성분을 포함하는 구획에서 copurify되는 것으로 확인되었다. 이 vesicle fraction은 바이러스에 감염되지 않은 strain 보다 CHV1에 감염된 strain에서 더 높은 농도로 축적된다. Pulse-chase analysis를 통해 CHV1에 감염된 strain에서 분비되는 cryparin의 속도와 양이 감염되지 않은 strain 보다 훨씬 낮은 것을 알 수 있었고, labeling 후 세포 내에 cryparin 체류시간이 감염되지 않은 strain 보다 CHV1에 감염된 strain이 상당히 늘어남을 확인하였다. 이러한 결과는 바이러스가 곰팡이 성장을 위한 중요한 key 단백질의 형성을 초래하는 특정 TGN secretory pathway 관여한다는 것을 제시한다.
